تحقیق روی باکتری ها نیازمند کار دقیق با تجهیزات و ابزارهای متعدد است. برای اینکه میکروارگانیسم ها در شرایط آزمایشگاهی هر چه سریعتر تکثیر شوند و بتوانند فعالیت حیاتی طبیعی خود را حفظ کنند، از محیط های غذایی مخصوص استفاده می شود. ترکیب و شرایط بیوفیزیکی آنها برای رشد فعال یک کشت باکتریایی مناسب است.
رسانه های مغذی. میکروبیولوژی و سایر کاربردها
کلنی های باکتری در آزمایشگاه روی ظروف پتری پر از محتویات ژله مانند یا نیمه مایع رشد می کنند. اینها محیط های مغذی هستند که ترکیب و خواص آنها تا حد امکان به مواد طبیعی برای رشد محصول با کیفیت نزدیک است.
چنین محیط هایی در تحقیقات میکروبیولوژیکی و در آزمایشگاه های تشخیص پزشکی استفاده می شود. این دومی اغلب با اسمیر باکتری های بیماری زا یا فرصت طلب کار می کند، که موقعیت سیستماتیک آنها مستقیماً در موسسه تعیین می شود.
طبیعی و مصنوعیچهارشنبه
قانون اساسی کار با باکتری ها، انتخاب صحیح محیط غذایی است. این باید معیارهای متعددی از جمله محتوای عناصر میکرو و ماکرو، آنزیم ها، مقدار ثابت اسیدیته، فشار اسمزی و حتی درصد اکسیژن موجود در هوا را داشته باشد.
مواد مغذی به دو گروه بزرگ طبقه بندی می شوند:
- محیط های طبیعی. چنین مخلوط هایی از مواد طبیعی تهیه می شوند. این ممکن است آب رودخانه، قسمت‌های گیاهی، کود، سبزیجات، بافت‌های گیاهی و حیوانی، مخمر و غیره باشد. چنین محیط‌هایی با محتوای بالای مواد شیمیایی طبیعی مشخص می‌شوند که تنوع آنها باعث رشد کشت باکتری می‌شود. با وجود این مزایای آشکار، محیط های طبیعی اجازه انجام تحقیقات تخصصی با سویه های باکتریایی خاص را نمی دهد.
- رسانه مصنوعی. تفاوت آنها در این است که ترکیب شیمیایی آنها در نسبت های دقیق همه اجزای تشکیل دهنده شناخته شده است. چنین محیط هایی برای کشت خاصی از باکتری ها تهیه می شود که متابولیسم آن از قبل برای محقق شناخته شده است. در واقع، به همین دلیل، می توان چنین محیط مصنوعی را برای رشد میکروارگانیسم ها آماده کرد. آنها برای تجزیه و تحلیل فعالیت حیاتی باکتری ها استفاده می شوند. به عنوان مثال، می توانید متوجه شوید که چه موادی را در محیط آزاد می کنند و چه مقدار. میکروارگانیسم‌ها در محیط‌های طبیعی نیز رشد خواهند کرد، اما به دلیل ناآگاهی از نسبت‌های اولیه مواد، امکان ردیابی تغییرات کمی در ترکیب وجود ندارد.
تفاوت-محیط های تشخیصی
در کار با باکتری ها، نه تنها از مواد مغذی معمولی می توان استفاده کرد. میکروب شناسی یک علم گسترده است و بنابراین، هنگام انجام یک مطالعه، گاهی اوقات به دلایلی لازم است که میکروارگانیسم ها را انتخاب کنید. استفاده از محیط‌های تشخیص افتراقی در آزمایشگاه این امکان را فراهم می‌کند که کلنی‌های باکتریایی مورد نظر بر روی ظرف پتری با توجه به علامت بیوشیمیایی فعالیت حیاتی آنها انتخاب شوند.
ترکیب چنین محیط هایی همیشه شامل اجزای زیر است:
1. مواد مغذی برای رشد سلولی.
2. سوبسترا (ماده) آنالیز شده.
3. شاخصی که در هنگام بروز واکنش خاصی رنگ مشخصی به آن می دهد.
یک مثال، محیط مغذی تشخیصی افتراقی "Endo" است. از آن برای انتخاب کلنی هایی از باکتری ها استفاده می شود که می توانند لاکتوز را تجزیه کنند. در ابتدا، این محیط دارای رنگ صورتی است. اگر یک کلنی از میکروارگانیسم ها قادر به تجزیه لاکتوز نباشد، رنگ سفید معمول را به خود می گیرد. اگر باکتری ها بتوانند این بستر را تجزیه کنند، به رنگ قرمز روشن مشخص تبدیل می شوند.
چهارشنبه های انتخابی
آزمایشگاه های تشخیصی اغلب با سواب هایی کار می کنند که حاوی انواع مختلفی از باکتری ها هستند. بدیهی است که برای کار باکیفیت، لازم است به نحوی کلنی های مورد نیاز خود را از بین ده ها فرد خارجی انتخاب کنیم. اینجاست که یک محیط رشد باکتری می تواند کمک کند، که به طور ایده آل برای حمایت از یک نوع میکروارگانیسم فرموله شده است.
برای مثال،چنین محیط انتخابی فقط برای تولید مثل اشریشیا کلی مناسب است. سپس از کاشت تعداد زیادی باکتری روی ظرف پتری، فقط کلنی هایی از همان اشریشیا کلی را خواهیم دید و نه بیشتر. قبل از شروع کار، لازم است متابولیسم باکتری مورد مطالعه را به خوبی بشناسید تا با موفقیت آن را از مخلوطی از گونه های دیگر انتخاب کنید.
محیط کشت جامد، نیمه جامد و مایع
باکتری ها را می توان نه تنها روی بسترهای جامد رشد داد. مواد مغذی از نظر حالت تجمع با یکدیگر متفاوت هستند که به ترکیب در طول ساخت بستگی دارد. در ابتدا، همه آنها یک قوام مایع دارند و وقتی ژلاتین یا آگار به درصد مشخصی اضافه می شود، مخلوط جامد می شود.
محیط های کشت مایع معمولاً در لوله های آزمایش یافت می شود. در صورت نیاز به رشد باکتری در چنین شرایطی، محلولی را با نمونه کشت اضافه کنید و 2-3 روز صبر کنید. نتیجه ممکن است متفاوت باشد: یک رسوب تشکیل می شود، یک لایه ظاهر می شود، تکه های کوچک شناور می شوند، یا یک محلول ابری تشکیل می شود.
محیط کشت متراکم اغلب در تحقیقات میکروبیولوژیکی برای مطالعه خواص کلنی های باکتریایی استفاده می شود. چنین محیط هایی همیشه شفاف یا نیمه شفاف هستند تا بتوان رنگ و شکل کشت میکروارگانیسم ها را به درستی تعیین کرد.
آماده سازی رسانه
بسترهایی مانند مخلوط گوشت-پپتون بر پایه آبگوشت، ژلاتین یا آگار بسیار آسان تهیه می شوند. اگر نیاز دارید که یک بستر جامد یا نیمه مایع را به مایع تبدیل کنید2-3٪ یا 0، 2-0، 3٪ ژلاتین یا آگار را به ترتیب اضافه کنید. آنها نقش عمده ای در سخت شدن مخلوط دارند، اما منبع مواد مغذی نیستند. بنابراین، محیط های غذایی مناسب برای رشد یک کشت باکتریایی به دست می آیند.
