روشهای تنظیم واکنش بارش

فهرست مطالب:

روشهای تنظیم واکنش بارش
روشهای تنظیم واکنش بارش
Anonim

این مقاله به پدیده واکنش بارش اختصاص دارد. در اینجا ویژگی های فرمولاسیون این پدیده، پدیده انتشار، ویژگی های کلی، نقش در زندگی انسان و بسیاری موارد دیگر را بررسی خواهیم کرد.

معرفی پدیده

ویژگی کلی واکنش بارش
ویژگی کلی واکنش بارش

بارش پدیده‌ای از نوع سرولوژیکی است که در طی آن آنتی ژن‌های محلول با آنتی‌بادی‌ها برهمکنش می‌کنند و در نتیجه، رسوب مشاهده می‌شود - یک رسوب. تأثیر هماهنگ آنتی ژن و آنتی بادی این نوع فعل و انفعالات امکان تعیین وجود آنتی ژن های ناشناخته در ماده آزمایش را با افزودن آنتی بادی ها و آنتی ژن های شناخته شده فراهم می کند. فرآیند بارش بدون حضور نمک بدتر پیش خواهد رفت و بهترین بهینه در محدوده pH 7.0-7.4 قرار دارد.

مواد تشکیل دهنده یک واکنش

اجزای واکنش بارش
اجزای واکنش بارش

سه عنصر اصلی در بین اجزای واکنش بارش وجود دارد:

  1. آنتی ژنی که ماهیت مولکولی دارد. در حالت نوع خوب است، به عبارت دیگر، آن استمحلول همچنین چنین آنتی ژنی رسوب زا نامیده می شود که یک لیزات یا عصاره بافتی و غیره است. یک رسوب زا دارای تفاوت مشخصه ای با آگلوتینوژن است که در اندازه ذرات آن نهفته است. آگلوتینوژن دارای اندازه سلولی ذاتی است و رسوب زاها متناسب با اندازه مولکول هستند. محلول آنتی ژن با شفافیت مشخص می شود.
  2. یک آنتی بادی موجود در سرم خون انسان و همچنین در سرم تشخیص ایمنی که حاوی آنتی بادی های مورد مطالعه است.
  3. الکترولیت ها محلول های کلرید سدیم هستند که ایزوتونیک هستند.

تولید پرسیپیتوژن

راه اندازی یک واکنش رسوبی بدون رسوب زا غیرممکن است که از آسیاب کردن مواد و استخراج آنتی ژن های پروتئینی از آنها به دست می آید. استخراج با جوشاندن یا روش های دیگر انجام می شود. نمونه ای از رسوب زاها.

راه اندازی در بارش

حالا روش تنظیم واکنش بارش را در نظر می گیریم. سرم به داخل حفره ظروف وارد می شود و با کمک یک لوله پیپت آن را روی دیوار می ریزد. در مرحله بعد، مقدار مناسب رسوب‌دهنده را با دقت در بالا قرار می‌دهیم و سپس لوله را از حالت افقی به حالت عمودی می‌آوریم.راه اندازی و در نظر گرفتن واکنش بارش یک عملیات بسیار دقیق است. نتیجه پس از ظهور یک حلقه سفید در مرز بین آنتی ژن و آنتی بادی ثبت می شود. اگر عناصر واکنش دهنده واکنش با یکدیگر مطابقت داشته باشند، آنها به هم متصل می شوند، اما این امر پس از مدت زمان طولانی از تعامل آنها قابل توجه است. اسلاید، جایی که ژل آگار منتقل می شود، آن را در یک لایه کوچک بمالید. پس از سفت شدن آن در ژل، تعداد کمی چاهک بریده می شود که آنتی ژن ها و آنتی بادی ها در آن قرار می گیرند. دو راه برای انجام این عمل وجود دارد: روش ایمونودیفیوژن شعاعی و ایمونودیفیوژن مضاعف.

واکنش بارش استفاده نمی شود
واکنش بارش استفاده نمی شود

اطلاعات عمومی

مکانیک کار بارش شبیه دستگاه آگلوتیناسیون است. تحت تأثیر سرم نوع ایمنی، آنتی ژنی که قبلاً وارد واکنش شده است، میزان پراکندگی آن را کاهش می دهد. یک شرط مهم شفافیت سرم و آنتی ژن است. در نتیجه ظاهر رسوبات به صورت حلقه قابل مشاهده است. این پدیده بارش حلقه ای نامیده می شود و در لوله های مخصوصی با قطر 2.5 تا 3.5 میلی متر انجام می شود. یکی از رایج ترین نمونه های واکنش رسوبی، تشخیص سیاه زخم است.

بارش امکان تعیین سطح سمیت کشت دیفتری در آگار را فراهم می کند.رسوب کمپلکس های آنتی ژنی و آنتی بادی ها رخ می دهد. بارش یک پدیده ایمونولوژیک است که به شما امکان می دهد مقدار آنتی بادی ها را در سرم خون افراد و حیوانات بیمار یا واکسینه شده تعیین کنید.

نتایج تیتراسیون

روشهای تنظیم یک واکنش بارش
روشهای تنظیم یک واکنش بارش

مهم است بدانید که داده های بدست آمده از تیتراسیون روش فوق قابل اندازه گیری نیستند. برای ایجاد و تجزیه و تحلیل یک ارزیابی کمی از تعداد آنتی‌بادی‌های موجود، یک تکنیک واکنش ویژه توسط M. Heidelberger و E. Kabat ایجاد شد که بر اساس جستجو و شناسایی منطقه هم ارز است. مخلوط کردن تعداد سن آنتی ژن ها با حجم ثابت آنتی سرم منجر به افزایش رسوب اولیه تشکیل شده می شود و سپس دوباره به دلیل افزایش توانایی حل کردن کمپلکس های آنتی ژن کاهش می یابد. با تعیین مقدار آنتی بادی های موجود در مایع رویی موجود در هر لوله، می توانید متوجه شوید که تعداد معینی از ظروف دارای آنتی بادی مایع ندارند. در اینجا، در مقایسه با سایر لوله های آزمایش، بزرگترین رسوب تشکیل خواهد شد. با توجه به این امر و کم کردن رسوب پروتئین آنتی ژنی از ارزش کل پروتئین ها، می توان مقدار دقیق آنتی بادی های موجود در حجم سرم خاص مورد مطالعه را بدست آورد. علاوه بر این، مقدار مولکول های پروتئین رسوب با مقدار نیتروژن یا با استفاده از روش های رنگ سنجی تعیین می شود.

ارزیابی مقادیر

تنظیم و محاسبه واکنش بارش
تنظیم و محاسبه واکنش بارش

برآورد مقادیر بارش در روش‌شناسی تشخیصی باید احتمال وجود آنتی‌بادی در سرم ایمنی را در نظر بگیرد که خاصیت رسوب‌پیتین را ندارد، که از آن نتیجه می‌شود که خود رسوب ممکن است وجود نداشته باشد. پس از واکنش با آنتی ژن ایجاد می شود. فهرست این مولکول‌ها شامل آنتی‌بادی‌های ناقص و برخی از گونه‌های گروه گلوبولین‌های گاما-A است.

واکنش بارش در شرایط آزمایشگاهی کاربرد خود را در انواع مختلف اصلاحات پیدا می کند. به عنوان مثال، واکنش حرارتی برای شناسایی آنتی ژن های باکتریایی بوتولیسم، سیاه زخم و غیره استفاده می شود که دچار دناتوره شدن حرارتی نمی شوند. برخلاف رسوب حلقه‌ای، این نوع واکنش از فیلترهای ماده مورد نظر در حالت جوشانده استفاده می‌کند. در چنین مواردی فرد به روش رسوب در آگار متوسل می شود و همچنین از ایمونوالکتروفرزیس استفاده می کند.

بارش پراکنده

واکنش های بارش
واکنش های بارش

در این حوزه تحقیقاتی، مفهوم واکنش بارش منتشر (RPD) وجود دارد. این بر اساس توانایی انتشار در ژل آنتی بادی ها و آنتی ژن های محلول است. انتشار توانایی یک مولکول از یک ماده خاص برای نفوذ به مولکول های ماده دیگر است که در اثر حرکت حرارتی ایجاد می شود.

ژل یک سیستم از نوع پراکنده است که در آن فاز مایع به طور مساوی در فاز جامد توزیع می شود. اغلب برای چنین واکنشی از ژل آگار استفاده می شود.

پس از دادن پارامترها، درشرایطی که در آن مولکول ها می توانند نسبت به یکدیگر منتشر شوند، ملاقات آنها با تشکیل کمپلکس آنتی ژن + آنتی بادی همراه خواهد بود. چنین نئوپلاسمی با قرار گرفتن در خود ژل قادر به انتشار است و رسوب می کند و شکل نواری به خود می گیرد که با چشم غیر مسلح قابل تشخیص است. اگر آنتی ژن و آنتی بادی همولوگ باشند، نواری تشکیل نمی‌شود. نوع کار مورد نیاز را تعیین کنید. RPD به فرد این توانایی را می دهد که ویروس های جدا شده ناشناخته را با آزمایش با استفاده از سرم های آنتی بادی شناخته شده شناسایی و شناسایی کند.

برنامه

واکنش بارش منتشر
واکنش بارش منتشر

بارش نه تنها در تشخیص بیماری ها کاربرد گسترده ای دارد، بلکه در معاینات پزشکی قانونی نیز کاربرد دارد. تصور تجزیه و تحلیلی که در آن بتوان گونه های خون، بخشی از اندام یا بافت یافت شده بر روی یک سلاح جنایت را که از واکنش بارش استفاده نمی کند، تعیین کرد، دشوار است. در طی این فرآیند از سرم های رسوب دهنده استفاده می شود که از ایمن سازی حیوانات و پرندگان مختلف به دست می آید. مهم است که سطح تیتر سرم کمتر از 1:10000 نباشد و همچنین باید دارای ویژگی کافی باشد. از نقطه شناسایی شده خون یا پوسته آن، عصاره ای برای فیزیکی ساخته می شود. راه حلی که بیشتر در معرض آن قرار خواهد گرفتسرم رسوب دهنده با توجه به این واکنش، می توان انواع پروتئین های بافتی و اندامی انسان و حیوان را تعیین کرد. به دست آوردن عصاره های ابری فرد را وادار می کند که به بارش در آگار متوسل شود.

نتیجه گیری

با تجزیه و تحلیل اطلاعات خوانده شده، می توان نتیجه گرفت که واکنش های بارش برای یک فرد بسیار مهم است، زیرا امکان تشخیص آنتی ژن های مختلف با استفاده از آنتی بادی ها را فراهم می کند، این پدیده همچنین به طور گسترده در معاینه پزشکی قانونی استفاده می شود و به شما امکان می دهد نوع آن را شناسایی کنید. خون، بافت یا اندام بر اساس یک موضوع خاص. چندین نوع و روش بارش وجود دارد که مطابق با نیازهای نوظهور مشکل در حال حل استفاده می شود.

توصیه شده: