تنوع عفونت های باکتریایی نیازمند شناسایی واضح پاتوژن و تعریف گونه های آن است. برای تعیین نوع میکروارگانیسم، میکروبیولوژیست ها از ویژگی های رنگی آن کمک می کنند - حساسیت میکروب به رنگ آمیزی با رنگ های مختلف. این روش به شما امکان می دهد مورفولوژی پاتوژن را بررسی کنید. خواص رنگی باکتری برای تحقیقات عملی و نظری در زمینه میکروبیولوژی اهمیت زیادی دارد.
تحقیق میکروبی
در باکتری شناسی، روش های زیادی برای رنگ آمیزی میکروارگانیسم ها وجود دارد. همه آنها بر اساس خواص رنگی باکتری ها هستند. رنگ آمیزی به شما امکان می دهد شکل، ساختار، اندازه، موقعیت نسبی آنها را تعیین کنید. این اجازه می دهد تا مشکلات سیستماتیک کردن انواع میکروارگانیسم های زیست شناسی عمومی و میکروبیولوژی مقایسه ای حل شود.
چرا آنها را رنگ کنید
باکتری ها عملا هستندموجودات شفاف، و بدون استفاده از رنگ آمیزی، برای میکروسکوپ معمولی ضعیف قابل مشاهده هستند. شما می توانید از انواع خاصی از میکروسکوپ (کنتراست فاز، میدان تاریک) برای مطالعه اشیا استفاده کنید، اما ساده ترین راه رنگ آمیزی است که پس از آن باکتری ها در میکروسکوپ نوری معمولی قابل مشاهده می شوند.
آماده سازی نمونه
صرف نظر از تکنیک رنگ آمیزی استفاده شده، قوانین یکسانی برای آماده سازی شی مورد مطالعه وجود دارد. مراحل زیر الزامی است:
- ابزار استریل روی یک لام شیشه ای لکه می کند.
- نمونه در حال خشک شدن است. این کار در دمای اتاق یا با استفاده از کابینت های خشک کن انجام می شود.
- به دنبال آن مرحله تثبیت - میکروارگانیسم ها با ترکیبات خاصی به شیشه متصل می شوند.
- رنگ‌آمیزی مناسب - نمونه برای مدت معینی با رنگ پوشانده می‌شود و پس از آن شسته می‌شود.
- خشک کردن نهایی - نمونه دوباره خشک می شود.
رایج ترین رنگها
رایج ترین رنگ های مورد استفاده بر پایه آنیلین با مقادیر مختلف اسیدی (pH) هستند. بیشتر رنگ ها پودرهایی هستند که در الکل رقیق شده اند.
رنگ هایی که در آنها کاتیون ها عامل رنگ هستند، پایه نامیده می شوند (PH بیشتر از ۷). آنها را می توان برای رنگ آمیزی میکروارگانیسم ها در رنگ های قرمز (سرخابی، سافرانین)، بنفش (متیل بنفش، تیونین)، آبی (متیلن آبی)، سبز (سبز مالاکیت)، قهوه ای (کریزوئیدین) و سیاه (ایندولین) استفاده کرد.
رنگ هایی که در آن عوامل رنگی آنیون هستند، اسیدی (PH کمتر از ۷) نامیده می شوند. آنها نمونه را به رنگ قرمز (ائوزین)، زرد (پیکرین) یا سیاه (نیگروسین) رنگ می کنند.
گروهی از رنگهای خنثی (مثلاً رودامین B) وجود دارد که در آن کاتیونها و آنیونها به عنوان عوامل رنگی عمل می کنند.
فرهنگ مرده یا زنده
روش های رنگ آمیزی با توجه به شکل زندگی نمونه آزمایش به دو گروه تقسیم می شوند.
- رنگ آمیزی حیاتی (در طول عمر). این روش مطالعه خواص میکروارگانیسم ها در مطالعه بافت های زنده استفاده می شود که امکان مشاهده فرآیندهای حیاتی میکروب ها را فراهم می کند. برای این رنگ‌آمیزی از رنگ‌هایی با سمیت کم و قدرت نفوذ بالا استفاده می‌شود.
- رنگ آمیزی پس از حیات. این رنگ آمیزی میکروارگانیسم های مرده یا کشته شده است. به لطف خواص رنگی باکتری ها، میکروبیولوژیست ها ساختار آنها را تعیین می کنند. این رنگ آمیزی است که بیشترین استفاده را دارد.
گرم مثبت و گرم منفی
این ویژگی های باکتری است که در دستورالعمل های داروهای مختلف یافت می شود. این روش برای بررسی خواص رنگی باکتری ها مبتنی بر استفاده از رنگ بنفش جنسی و تثبیت ید است. این تکنیک هانس کریستین گرام، پزشک دانمارکی است که در سال 1884 آن را پیشنهاد کرد. در نتیجه این رنگ‌آمیزی، باکتری‌ها به دو گروه تقسیم می‌شوند:
- گرم (+) - آبی شوید(استافیلوکوک و استرپتوکوک).
- گرم (-) - رنگ صورتی تا قرمز (آنتروباکتری ها، سالمونلا، E. coli).
نتایج مختلف رنگ آمیزی به دلیل خواص رنگی متفاوت دیواره باکتری است. روش رنگ آمیزی گرم هنوز هم روش اصلی در تشخیص برخی از بیماری های عفونی است.
سایر تکنیک های رنگ آمیزی
بیایید چند روش دیگر که به طور گسترده در باکتری شناسی استفاده می شود را مشخص کنیم.
روش
هاگ دیده می شود
رنگ آمیزی فوشین Tsiel به شما امکان می دهد هاگ های باکتری را ببینید. با داشتن رنگ صورتی پس از رنگ آمیزی، آنها به وضوح در پس زمینه باکتری های آبی قابل مشاهده هستند. این روش نیز یک ابزار باکتری شناسی است و اهمیت عملی زیادی دارد.
